菌液PCR可靠吗
菌液PCR用来鉴定构建好的克隆或者亚克隆是可靠的。
PCR体系小一些也是可以的,只要注意,菌液的量一定不能过多,一般10微升的PCR体系中,加入过夜培养的菌液只需0.5微升。或者当菌在培养板上生长出来的时候,用灭菌牙签或者枪头蘸取,再沾到PCR体系中,然后扔掉枪头或者牙签就可以了。
PCR程序的设置按正常值设置,不需要增加循环数,一般如果材料是构建成功的,15个循环就完全可以看出目的条带。想要保证菌液PCR可靠,另一个要注意的是要设置好阳性与阴性对照,特别是阴性对照。如果是想直接从基因组里面获得某个基因或者片段,建议使用纯的DNA模板来操作比较好。
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